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PCR实验室怎么建-99%的人会忽视的问题

时间:2020-10-23 16:24:44 来源:铂克空调 点击:

  PCR,即聚合酶链反应,是分子生物学研究和实验的常规方法,也是广泛应用于生物学,医学和临床领域的实验技术。它的特点是可以大大增加DNA的痕量。实验室分为四个区域,每个工作区域必须严格按一个方向输入。不同的工作区域使用不同的工作服(例如,不同的颜色)。工人离开每个工作区时不得带工作服。四个领域是:

  1.试剂准备区

  2.样品处理区

  3.核酸扩增区

  4.产品分析区域

  pcr实验室规划图

  PCR实验室可以是分散形式或组合形式。为了完成一组PCR实验,通常应完成试剂制备,样品处理,核酸扩增和产物分析的四个实验过程。如果实验技术要求,则应增加样品破碎过程。

  1.分散PCR实验室

  所谓的分散式PCR实验室是指完成上述实验过程的实验室彼此远离,并以分散的形式布置。对于具有这种布置的PCR实验室,由于每个实验都很难相互干扰,因此不需要特殊条件。

  2.组合式PCR实验室

  所谓组合PCR实验室是指将完成PCR的四个实验过程的实验室彼此相邻布置以形成独立的实验区域的形式。对于组合PCR实验室,由于各种实验的集中安排,很容易引起相互干扰。因此,对整体布局和屏障系统有一定的要求。每个房间的入口处都有缓冲室,以减少室内和室外空气的交换。试剂制备室和样品处理室应有轻微的正压,以防止含有核酸气溶胶的空气进入并造成污染;核酸扩增室和产物分析室应具有轻微的负压,以防止含气溶胶的核酸扩散到污染试剂和样品中。

  如果使用荧光PCR仪,则可以将扩增室和产物分析室合并在一起。

  如果房间深度允许,可以在PCR内设置专用走廊。需要指出的是,在减少室内和室外空气的交换中,缓冲室比专用走廊更有意义。

  每个区域之间应存在单向实验过程流,物流,人员流和空气流,以形成单向过程的保护性屏障,以避免实验之间的相互干扰并防止核酸气溶胶污染实验过程和产生错误的结果。

  PCR实验室的气流方向必须严格按照逐渐降低试剂存储和制备区域→样品制备区域→扩增区域→扩增产物分析区域中的气压的方法进行,以防止扩增产物进入反应室。放大前的区域以及气流。需要严格的通风设计。如果通风设计不合理,风速将会混乱甚至危害人体健康。

  进入实验室区域的工人应遵循以下路径:

pcr实验室空气流量

  公共清洁区更衣室(换洗衣服)-缓冲室-实验区污染

  工作人员离开实验室的途径是:

  污染测试区-缓冲间-淋浴房(如果可能的话可以设置)-更衣室-公共清洁区

  标准PCR实验室设计规范

  1.主要结构

  主体是彩色钢板和铝合金型材。房间内的所有内角和外角均由带有内部圆形铝的铝合金50制成,以解决易污染,积尘,难以清洁的问题。结构牢固,线条简洁,外观大方,密封性好。

  2.标准的三区分离和气压调节

  PCR过程分为三个独立的实验区域:试剂制备,样品制备和PCR扩增检测。整个区域都有一条整体的缓冲走廊。每个独立的实验区域都配备了缓冲区,每个区域都通过气压进行调节,以防止试剂和样本在整个PCR实验过程中受到气溶胶的污染,并减少扩增产物对人员和环境的污染。

  缓冲液Ⅰ,缓冲液Ⅱ和PCR扩增区的排风扇可以打开排气。实验区域的外墙和每扇门都装有可调节风量的回风孔,空气通过回风孔排入房间。 。

  3.消毒

  紫外线灯安装在三个实验区域和三个缓冲区的顶部以及透射窗内部,用于消毒。

  在试剂制备区和标本制备区,还安装了移动式紫外线灯,以对实验台进行局部消毒。

  4.机械联锁不锈钢传送窗

  试剂和标本通过机械互锁不锈钢(不建议使用电子互锁方法)传输窗口交付,以确保在传输过程中不污染试剂和标本(个人分流)。

  5.地面

  建议使用PVC卷曲地板或自流地板作为地面,其完整性要好。易于清洁且耐腐蚀。如果没有条件,可以使用水磨石地面,或者大瓷砖的接缝(至少800mm×800mm)应小于2mm。

  6.照明

  该灯应为纯净灯,以达到易于清洁,无灰尘堆积的特点。

PCR实验室

  pcr实验室施工过程中应注意:

  ●标准的安装流程和全面的服务流程。

  ●严格遵循标准化,科学设计的安装过程。

  ●安装前,需要确定以下安装条件:电源电压,电源入口位置,电话网线入口位置,进水口压力,最小安装空间,地面平整度,通风口,入口管和落水管位置等。,理想的空间尺寸和通风口尺寸。

  ●实验室的墙壁,包括天花板,应具有牢固的结构和良好的气密性;所有内角应采用弧形过渡;墙壁应光滑,不吸水,耐腐蚀,易于清洁和消毒;地板材料应符合间隙,无泄漏,光滑度和耐腐蚀的要求。

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